比浊胺试纸法二苯硝基硝酸钾素速测钴钠养分亚法六

植物从土壤中吸收的钾素钾，在植株组织中基本上是养分以离子态存在，它的速测试纸含量变化与土壤钾素供应状况极为敏感。植株组织中钾的硝基硝酸速测可采用压汁或浸提剂提取测定。由于组织中钾浓度一般都比土壤有效钾高得多，苯胺比浊测定方法一般不用灵敏度较高的法亚法四苯硼纳比浊法，而用灵敏度较低的钴钠六硝基二苯胺试纸法或亚硝酸钴纳法。

1、钾素方法原理

（1）六硝基二苯胺试纸法：在碱性条件下，养分六硝在二苯胺呈红色，速测试纸而在酸性条件下呈淡黄色。硝基硝酸当六硝基二苯胺与钾作用，苯胺比浊则生成桔红色的法亚法六硝基二苯胶钾盐淀沉，在酸性条件下仍保持桔红色，钴钠六硝基二苯胺的钾素浓度愈大，对钾的反应灵敏度也愈高。依据颜色的情况可以判断试样含钾量。

（2）亚硝酸钴钠比浊：亚硝酸钴钠在pH6.5～pH7.0的条件下与钾离子作用，形成K₂NaCo (NO₂)₆黄色沉淀，这种沉淀在异丙醇中可降低其溶解度而呈现混浊，其混浊度与钾含量成正相关，因此，可根据混浊程度来判断试样含钾量。

2、仪器设备

容量瓶；小烧杯；试剂瓶；压汁器；吸管；滴管；电热吹风机；剪刀；滤纸；纱布；塑料袋。

3、试剂配制

（1）六硝基二苯胶溶液:一级溶液。称0.6g六硝基二苯胺([C₆H₂(NO₂)₃]₂NH /和0.6g碳酸钠(Na₂CO₃)放入小烧杯中，加水搅拌，在水浴中煮沸溶解，冷却后定容25 mL;二级溶液。吸取一级溶液8 mL，加水定容为25 mL，三级溶液，吸取二级溶液10 mL，加水定容为25 mL;

（2）六硝基二苯胶钾试纸的制备:用细口皮头滴管(可用小塑料滴瓶装上注射针头)，分别吸取配测好的六硝基二苯胺三级溶液，依次滴在5cm～8cm长，宽1cm的定性滤纸条上，滴点直径控制在0.5cm～0.8cm为宜。随即用电热吹风机吹干或阴干。试纸上的3个色点，依浓度高低分别呈“桔红”、“桔橙”、“桔黄”。干燥条件下，可保存1a，配制好的钾试纸最好用标准钾溶液进行标定；

（3）盐酸溶液:p=1.19g·cm^-1浓盐酸4 mL，加90 mL水稀释;

（4）钾标准液:称105℃烘干的氯化钾0.7627g，溶于100 mL水中，此为p(K)=4000mg·L^-1钾标准液。据此稀释配制系列钾标准液(校正钾试纸和配制比浊的系列钾标准浊度);

（5）亚硝酸钴钠母液:称5g亚硝酸钴钠［Na₃CO)NO₂)₆〕和30g亚硝酸钠［NaNO₂),溶于80 mL蒸馏水中，然后加入5 mL冰乙酸，用蒸馏水定容到100 mL，开口放置1d～2d，让有毒含氮氧化物气体逸出后应用。

（6）亚硝酸钠溶液:称15g亚硝酸钠(NaNO₂)溶于100mL蒸馏水;

（7）亚硝酸钴钠稀释液:测定前，取亚硝酸钴钠母液(试剂5)5 mL与亚硝酸钠溶液(试剂6)100 mL混合摇匀。

（8）异丙醇[(CH₃)₂CHOH];

（9）冰乙酸(CH₃000H)。

4、操作步骤

采取代表性植株10株～20株，用湿布擦干净，取其叶柄或叶鞘或茎节，剪碎、棍匀、榨汁或浸提待测。

（1）钾试纸点滴法：吸取汁液，分别滴在制配好的六硝基二苯胺试纸条的3个色点上，汁液滴量控制到湿润色点即可，经1min～2min后.向加过汁液的3个色点，各加1滴盐酸溶液(试剂3).然后观察色点褪色情况来判断汁液含钾最。

2.亚硝酸枯钠比浊法于管口直径15mm的10mL刻度试管中，加入2.5 mL亚硝酸钴钠稀释液(试剂7),滴入1滴汁液，摇匀后，加入1 mL异丙醇，再摇匀，经15 min后转入内径1.0 cm～1.2cm比浊管与同时同样操作的系列钾标准浊度比浊，可用浊度标准线或五号印刷字体上比浊定量。

5、结果计算

（1）钾试纸点滴法测定结果计算

测试时，观察到的色点变化可判断试样含钾量。当钾试纸上3个色点都变成黄色时，表示测试的汁液不含钾或钾浓度很低。3个色点都呈桔黄色时，表示含钾＜500mg·L^-1。仅第一级色点为桔红色时，含钾在750mg·L^-1～1000mg·L^-1一级和二级色点都呈枯红色时，含钾量为2000mg·L^-1～3000mg·L^-1。如果三个色点都呈桔红色或第三级色点呈浅桔红色，表示含钾量＞3000 mg·L^-1。

（2）亚硝酸钴钠钾比浊法结果计算

比浊标准: ①利用五号印刷字体透视比浊定量:显浊液转入直径1.0cm～1.2cm的比浊管，在15 min～30 min内进行比浊。比浊管背后衬一张印有五号字体的文章，透过浊液看后面字迹。如果字进清晰放大，浊液钾浓度为5 mg·L^-1～10mg·L^-1。字迹显示模糊，但尚能看出字迹，浊液钾浓度为10mg·L^-1～15mg·L^-1。如果看不清字迹，表明浊液钾浓度高于20mg·L^-1。②利用分光光度计或光电比色计比浊:钾比浊系列标准曲线用4000mg·L^-1钾标准液，稀释成0mg·L^-1,250mg·L^-1,500mg·L^-1,700mg·L^-1,1000mg·L^-1，钾系列标准。各取1滴分别加入2.5 mL亚硝酸钻钠稀释液，摇匀，再加入1 mL异丙醉显浊。即成为0mg·L^-1,5mg·L^-1,10mg·L^-1,5mg·L^-1,20mg·L^-1钾标准系列浊度，显浊后15min～30 min内，在光电比色计上用650nm建光片进行比浊，用半对数纸作出亚硝酸钻钠钾比浊标准曲线，作为同样操作显浊的试样，查出相应浊度的钾含量。

植株汁液(K)含量mg·L^-1=p×V₁/V₂；

式中:p——比浊测得的Kmg·L^-1数;

V₁——显浊液总体积毫升数;

V₂——比浊用汁液毫升数(以每滴为0.05 mL计)。

6、结果解释

（1）三级钾试纸测定汁液钾的评估。第一级色点褪色不完全，二、三级色点变为柠檬色，表示汁液含钾量很低，植株缺钾。第一级色点不褪色，第二级色点褪色不完全，第三级色点变为柠檬黄色，表示汁液含钾量中等。如果3个色点都呈桔红色，表示汁液含钾量高，植株不缺钾。从有关资料得知，水稻、小麦、大麦主要作物植株组织汁液钾素状况，用钾试纸测定，含量达3000mg·L^-1钾以上时，表示植株钾素营养丰富，低于1000mg·L^-1时，则表示植株缺钾。

（2）亚硝酸钴纳钾比浊测定结果评估

棉花叶柄的含钾量，花铃期主茎下3叶柄～4叶柄的临界浓度为0.6%。

参考资料：土壤农业化学分析方法